菌种的保藏一般选用哪种办法?

时间:2020-06-22 09:03来源:未知 作者:ydgmve2020yyx 点击:
菌种的保藏一般选用哪种办法?液氮罐厂家表示液氮超低温保藏法是现在保存微生物菌种*牢靠的办法,多数*级菌种保藏单位都采用此法。 自增压液氮罐 1、准备安培管 用于液氮保藏的安
菌种的保藏一般选用哪种办法?液氮罐厂家表示液氮超低温保藏法是现在保存微生物菌种*牢靠的办法,多数*级菌种保藏单位都采用此法。自增压液氮罐

1、准备安培管 用于液氮保藏的安培管,要求能耐受温度忽然改变而不致决裂,因而,需求采用硼硅酸盐玻璃制造的安培管。安培管的大小通常使用75×10mm的安培瓶。

2、加保护剂与灭菌 保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易涣散的细胞时,则将空安培管塞上棉塞,在压力0.11MPa,温度121℃条件下灭菌15min;若保存霉菌菌丝体则需在安培管内预先参加保护剂,如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲亚砜蒸馏水溶液,参加量以能浸没今后参加的菌种块为限,而后再进行高压灭菌。


3、接入菌种 将菌种用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液,装入已灭菌的安培管;霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器,从平板内切取菌落圆块,放入含有保护剂的安培管内,然后用火焰熔封。浸入水中检查有无缝隙。

4、冻住 再将已封口的安培管以每分钟下降1℃的慢速冻住至-30℃。若细胞急剧冷冻,则在细胞内会构成冰的结晶,因而下降存活率。

5、保藏 经冻住至-30℃ 的安培管当即放入液氮冷冻保藏器的小圆筒内,然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃,液态氮为-196℃。

6、恢复培养 保藏的菌种需求用时,将安培管取出,当即放入38~40℃的水浴中进行急剧冻结,直到全部融化为止。再打开安培管,将内容物移到适宜的培养基上培养。自增压液氮罐

综上所述,此法除了适宜于一般微生物的保藏外,对于一些用冷冻干燥法都难以保藏的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以构成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞都可长时间保藏,并且不易发作变异。缺点是需求特别设备,以上内容仅供了解,如有问题请与咱们取得联系以便及时调整。
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